一、服务简介：
现在优惠促销，欢迎来电咨询。
免费赠送3个读码框处理，以确保蛋白可以正常表达。
可以选择提供转化到酵母的文库，可以提供足够100次筛选的酵母转化菌液文库，同时还会提供质粒文库。
可选均一化处理，可以有效提高低丰度基因筛选检出率。
| 文库构建（不同技术方法） | 报价 |
| Clonetech-SMART技术方法 | 询价 |
| Invitrogen-Gateway技术方法 | 询价 |
| All-Direct技术方法 | 询价 |
—— 突破原核 mRNA 分离技术瓶颈
细菌 mRNA 分离挑战
无 polyA 尾：传统 oligo (dT) 磁珠法无法直接应用
高丰度 rRNA 干扰：占总 RNA 的 80-90%，需高效去除
易降解性：mRNA 半衰期短（2-10 分钟），需快速处理
2.2 解决方案
细菌 mRNA 分离
样本处理：
▶ 对数生长期菌液（OD600=0.6-0.8）
▶ 液氮速冻后研磨破碎
提取方法：
▶ 试剂盒示例：Bacterial mRNA Enrichment Kit
质检标准：
▶ mRNA 纯度：OD260/280=1.8-2.0
▶ rRNA 残留：<5%（Agilent Bioanalyzer 检测）
文库构建
| 指标 | 传统方法 | 宝吉优化方法 | 数据支撑 |
|---|
| mRNA 纯度 | 含大量 rRNA | rRNA 残留 < 5% | Bioanalyzer 检测报告 |
| 建库成功率 | <40% | ≥85% | 50 + 细菌物种实测数据 |
| 插入片段长度 | 500-800 bp | 1.2-1.5 kb | 随机挑取 100 克隆测序 |
| 低丰度基因保留率 | <30% | ≥70% | qRT-PCR 检测稀有基因 |
| 服务类型 | 技术参数 | 交付内容 | 报价 |
|---|
| 核系统文库 | - 细菌 mRNA 分离（试剂盒）
- 库容量≥5×10⁶ CFU - 核系统文库载体（pGADT7) | ▶ 大肠杆菌甘油菌（1×107 CFU+）
▶ 文库质粒（500 μg+）
▶ 质检报告 | 询价 |
| 均一化文库 | - DSN 法均一化处理
- 高丰度基因占比 < 15% | ▶ 均一化报告
▶ 插入片段检测报告 | 询价 |
| 膜蛋白文库 | - 膜系统载体适配（pBT3-N/pPR3-N）
- 跨膜区预测 + 实验验证 | ▶ 大肠杆菌甘油菌（1×107 CFU+）
▶ 文库质粒（500 μg+）
▶ 质检报告 | 询价 |
| 步骤 | 传统基因组直接建库 | 宝吉 mRNA 建库 | 优势说明 |
|---|
| 起始材料 | 基因组 DNA | 富集 mRNA | 直接获取表达基因，减少非编码区干扰 |
| 插入片段 | 随机片段 | 完整 CDS 区（含 UTR） | 保留调控元件，提高互作真实性 |
| 表达验证 | 真核/原核双系统兼容 | 真核/原核双系统兼容 | 支持酵母/大肠杆菌双平台验证 |
| 指标 | 技术参数 | 检测方法 |
|---|
| 库容量 | ≥1×107 CFU（原始库） | 梯度稀释平板计数法 |
| 插入片段长度 | 1.2±0.3 kb（平均） | 电泳 + 测序验证 |
| 空载率 | <3%（菌落 PCR 验证） | 随机挑取24个 克隆检测 |
| 基因覆盖度 | ≥90%（看家基因） | qRT-PCR |
案例 1：沙门氏菌毒力因子研究
技术方案：
▶ 探针法富集 mRNA
▶ All-Direct 文库构建（库容量 >1×107 CFU）
▶ 膜系统酵母双杂交筛选
关键发现：
▶ 鉴定到毒力蛋白 SopE2 的互作伴侣 SipA
▶ 揭示 Ⅲ 型分泌系统调控新机制
成果发表：PLOS Pathogens 2022, IF=6.29
案例 2：大肠杆菌应激响应研究
2.8 技术亮点：
专属 mRNA 分离流程：突破原核 mRNA 分离技术瓶颈
双系统表达验证：支持酵母 / 大肠杆菌双平台功能验证
严格质量控制：从 mRNA 提取到文库质检的全流程标准化操作
案例丰富：已完成沙门氏菌、大肠杆菌、结核分枝杆菌等 10 + 原核物种建库
